Laporan Praktikum Pembuatan Media

LAPORAN

PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DASAR

PEMBUATAN MEDIA

Nama              : Andri Tri Madani

NIM                : J1A116040

Kelompok      : 2

Shift                : 1

Asisten            : 1. Ika Gusriani, S.TP., M.P.

   2. Hirayati, S.Si

  

JURUSAN TEKNOLOGI HASIL PERTANIAN

FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN

UNIVERSITAS JAMBI

2017

I.                   PENDAHULUAN

1.1  Latar Belakang

Mikroorganisme dapat berkembang biak secara alami atau dengan campur tangan manusia. Mikroorganisme yang dikembangkan oleh manusia di antaranya melalui pertumbuhan menggunakan media. Pada pembuatan media ini, haruslah dimengerti jenis-jenis nutrien yang diperlukan oleh bakteri dan juga keadaan lingkungan fisik yang dapat menyediakan kondisi optimum bagi pertumbuhannya.

Medium pertumbuhan adalah media yang digunakan dalam pertumbuhan mikroorganisme untuk keperluan penelitian dalam bidang ilmu mikrobiologi. Mikroorganisme yang akan diamati akan ditumbuh kembangkan dalam media seperti nutrien agar (NA) dan potato dektrosa agar (PDA). Dalam pembuatan medium pertumbuhan, alat maupun bahan yang akan digunakan haruslah steril dan tidak dalam keadaan terkontaminasi. Berhasil atau tidaknya pembuatan medium pertumbuhan dipengruhi oleh tahap yang disebut dengan sterilisasi. Tahap sterilisasi adal tahap dimana semua alat dan bahan yang akan digunakan melalui proses pembunuhan dan pencegahan mikroorganisme yang tidak diharapkan tumbuh pada media yang akan digunakan.    

Semua makhluk hidup membutuhkan nutrient untuk melakukan pertumbuhan dan reproduksinya. Untuk menelaah mikroorganisme di Laboratorium, kita harus dapat menumbuhkan mereka. Mikroorganisme dapat berkembang biak dengan alami atau dengan bantuan manusia (Label, 2008). Media adalah suatu bahan yang terdiri atas campuran nutrisi yang dipakai untuk menumbuhkan mikroba. Media harus mengandung semua unsur hara dan nutrien yang diperlukan untuk pertumbuhan dan perkembangan mikroba agar mikroba dapat tumbuh dan berkembang biak. Nutrien merupakan bahan baku yang digunakan untuk membangun komponen-komponen baru dan untuk menghasilkan energi yang dibutuhkan dalam proses kehidupan sel.

Oleh karena itu, untuk mengenal lebih jauh tentang pembuatan medium untuk suatu mikroba, maka diadakanlah praktikum ini, dimana dalam prakitukum ini praktikan diwajibkan mampu mengetahui cara-caranya mulai dari awal sampai akhir melalui bimbingan dari kakak asisten.

1.2  Maksud dan Tujuan

Adapun maksud dari praktikum ini adalah :

• ·         Dengan melakukan praktikum ini, maka praktikan dapat mengenal lebih jauh tentang cara-cara pembuatan medium tumbuh bakteri.

Adapun tujuan dari praktikum ini adalah :

• ·         Mengetahui dan memahami  prosedur cara pemembuatan medium tumbuh bakteri.

II.                TINJAUAN PUSTAKA

Mikroorganisme sebagai makhluk hidup sama dengan organisme hidup lainnya, sangat membutuhkan energi dan bahan-bahan untuk membangun pertumbuhannya, seperti dalam sintesa protoplasma dan bagian-bagisn sel yang lainnya. Bahan-bahan tersebut disebut nutrien. Untuk memanfaatkan bahan-bahan tersebut, maka sel memerlukan sejumlah kegiatan, sehingga menyebabkan perubahan kimia di dalam selnya. Semua reaksi yang terarah yang berlangsung di dalam sel ini disebut metabolisme. Metabolisme yang melibatkan berbagai macam reaksi di dalam sel tersebut, hanya dapat berlangsung atas bantuan dari suatu senyawa organik yang disebut katalisator organik atau biasa disebut biokatalisator yang dinamakan enzim. Untuk dapat memahami tentang nutrisi dan metabolisme ini, pengetahuan dasar biokimia angat dibutuhkan (Natsir dan Sartini, 2006).

Medium adalah suatu bahan terdiri atas campuran nutrisi atau zat hara (nutrien) yang digunakan menumbuhkan mikroorganisme di atas atau di dalamnya. Selain itu, medium dapat dipergunakan pula untuk isolasi, perbanyakan, pengujian sifat-sifat fisiologis, dan penghitungan jumlah mikroorganisme. Hal ini erat kaitannya dengan postulat koch; untuk menetapkan suatu jenis mikroba sebagai penyebab penyakit harus  terlebih dahulu harus mendapatkan mikroba dalam keadaan murni (pure culture) untuk diselidiki sifat-sifatnya. Untuk tujuan tersebut sangat diperlukan suatu medium  (perbenihan) sebagai tempat tumbuh dan  isolasi mikroorganisme.(Waluyo,2008)

Medium yang digunakan untuk menumbuhkan dan mengembangbiakkan mikroorganisme harus sesuai susunannya dengan kebutuhan jenis-jenis mikroorganisme yang bersangkutan. Beberapa mikroorganisme dapat hidup baik pada medium yang sangat sederhana yang hanya mengandung garam anargonik di tambah sumber karbon organik seperti gula. Sedangkan mikroorganime lainnya memerlukan suatu medium yang sangat kompleks yaitu berupa medium ditambahkan darah atau bahan-bahan kompleks lainnya (Volk, 1993)

Untuk keperluan hidupnya, semua makhluk hidup memerlukan bahan makanan. Bahan makanan ini diperlukan untuk sintesis bahan mikroorganisme, untuk kehidupannya membutuhkan bahan-bahan organik dan anorganik dari lingkungannya. Bahan-bahan tersebut disebut dengan nutrien (zat gizi).

Peran utama nutrien adalah sebagai sumber energi, bahan pembangun sel, dan sebagai aseptor elektron dalam reaksi bioenergetik (reaksi yang menghasilkan energi). Oleh karenanya bahan makanan yang diperlukan terdiri dari air, sumber energi, sumber karbon, sumber aseptor elektron, sumber mineral, faktor pertumbuhan, dan nitrogen.

Makhluk hidup menggunakan sumber-sumber nutrien dapat dalam bentuk padat, tetapi ada juga yang hanya dapat menggunakan sumber nutrien dalam bentuk cair (larutan). Bila jasad hidup menggunakan sumber nutrien dalam bentuk padaat digolongkan tipe holozoik, sedangkan yang menggunakan nutrien dalam bentuk cairan tergolong dalam tipe holofitik. Namun ada hidup holofitik dapat juga menggunakan sumber nutrien dalam bentuk padat, tetapi bahan tersebut dicerna dahulu diluar sel dengan bantuan enzim ekstraseluler (Waluyo,2007).

Menurut Pelczar (1996), klasifikasi medium berdasarkan fungsinya digolongkan menjadi 7 golongan, yaitu:

•             Medium umum, merupakan media yang ditambahkan bahan-bahan yang bertujuan menstimulasi pertumbuhan mikroba secara umum. Contoh: Nutrien Agar (NA) untuk menstimulasi pertumbuhan bakteri, Potato Dextose Agar (PDA) untuk menstimulasi pertumbuhan fungi.
•                 Medium khusus, merupakan medium untuk menentukan tipe pertumbuhan mikroba dan kemampuannya untuk mengadakan perubahan-perubahan kimia tertentu. Contoh: medium tetes tebu untuk Saccharomyces cerevisiae.
•                   Media diperkaya (enrichment media), merupakan media yang ditambahkan bahan-bahan tertentu untuk menstimulasi pertumbuhan mikroba yang diinginkan. Hal ini dilakukan untuk menstimulasi pertumbuhan mikroba yang jumlahnya sedikit dalam suatu campuran berbagai mikroba. Contoh: Chocolatemedia dan Yeast-Extract-poptasium Nitrat Agar.
•                Media selektif, merupakan media yang ditambahkan bahan-bahan tertentu yang akan menghambat pertumbuhan mikroba yang tidak diinginkan yang ada dalam suatu spesimen. Inhibitor yang digunakan berupa antibiotik, garam dan bahan-bahan kimia lainnya.
•     Media differensial, merupakan media yang ditambahkan bahan-bahan kimia atau reagensia tertentu yang menyebabkan mikroba yang tumbuh memperlihatkan perubahan-perubahan spesifik sehingga dapat dibedakan dengan jenis lainnya.
•        Medium penguji (Assay medium), merupakan medium dengan susunan ertentu yang digunakan untuk pengujian senyawa-senyawa tertentu dengan bantuan bakteri. Contoh: medium untuk menguji vitamin-vitamin, antibiotik, dan lain-lain.
•               Medium perhitungan jumlah mikroba yaitu medium spesifik yang digunakan untuk menghitung jumlah mikroba dalam suatu bahan. Contoh: medium untuk menghitung jumlah bakteri E. Coli air sumur.

III.             METODOLOGI

3.1  Waktu dan Tempat

Waktu pelaksanaan Praktikum Mikrobiologi adalah Rabu, 5 April 2017 pukul 15.00 – 17.00 WIB bertempat di Laboratorium Biologi Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Jambi.

3.2  Bahan dan Alat

·         Bahan

1.      Nutrient Agar (NA) 10 gram

2.      Aquades

3.      Aluminium Foil

4.      Plastik Wrap

5.      Kapas

6.      Tissue

7.      Kertas Label

·         Alat

1.      Hot Plate

2.      Stirer

3.      Timbangan Analitik

4.      Batang Pengaduk

5.      Erlenmeyer 500 ml

6.      Erlenmeyer 250 ml

7.      Hot Hands

8.      Lemari Pendingin

3.3  Skema Kerja

1.      Siapkan alat dan bahan.

2.      Timbang media Nutrient Agar (NA) 10 gram dengan menggunakan Timbangan Analitik. Kemudian, masukkan serbuk media secara hati-hati kedalam Erlenmeyer 500 ml.

3.      Tambahkan Aquades sebanyak 500 ml. Aduk menggunakan Batang Pengaduk hingga merata.

4.      Panaskan medium NA menggunakan Hot Plate dengan pengaduk stirer pada suhu 8 dan putaran 8.

5.      Tunggu sampai media tercampur homogen (ditunjukkan dengan warna jernih/bening). Perhatian : sewaktu pemanasan jangan sampai terbentuk buih berlebihan sampai meluap.

6.      Lalu, matikan Hot Plate.

7.      Pindahkan medium NA ke dalam Erlenmeyer 250 ml sebanyak 125 ml.

8.      Lalu tutup menggunakan Kapas dilapiskan Aluminium Foil serta gunakan Plastik Wrap untuk mencegah masuknya mikroba.

9.      Kemudian medium di masukkan ke dalam Lemari Pendingin.

IV.             HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1  Hasil Praktikum

Dari praktikum yang dilakukan hasil yang di dapatkan praktikan adalah :

 Gambar.1.1 Media NA saat dipanaskan 

  Gambar.1.2 Media NA setelah dipanaskan

4.2  Pembahasan

Medium adalah suatu bahan yang terdiri atas campuran nutrisi yang dipakai untuk menumbuhkan mikroba. Selain untuk menumbuhkan mikroba, medium dapat digunakan pula untuk isolasi, memperbanyak, pengujian sifat-sifat fisiologi dan perhitungan mikroba.

Media agar untuk bakteri digunakan media NA (Nutrient Agar) dimana NA berfungsi untuk membiakkan berbagai macam bakteri. Sedangkan medium NA yang instan merupakan media non sintetik, karena menggunakan bahan yang terdapat di alam, biasanya tidak diketahui kandungannya. Struktur protein media non sintetik itu besar dan relatif insolubel yang mana hanya sebagian kecil bakteri saja. Susunan dan kadar nutrisi suatu medium untuk pertumbuhan mikroba harus seimbang agar dapat tumbuh optimal. Hal ini perlu dikemukakan mengingat banyak senyawa yang menjadi zat penghambat atau racun bagi mikroba jika kadarnya terlalu tinggi.

Nutrient Agar (NA) merupakan suatu  medium yang berbentuk padat yang merupakan perpaduan antara bahan alamiah dan senyawa-senyawa kimia. Dalam hal ini agar digunakan, karena sifatnya yang mudah membeku dan mengandung karbohidrat yang berupa galaktam sehingga tidak mudah diuraikan oleh mikroorganisme. Medium Nutrient Agar (NA) merupakan medium yang berwarna coklat muda yang memiliki konsistensi yang padat dimana medium ini berasal dari sintetik dan memiliki kegunaan sebagai medium untuk menumbuhkan bakteri.

V.                PENUTUP

5.1  Kesimpulan

Dari praktikum yang telah dilaksanakan praktikan dapat menarik kesimpulan :

1. Medium adalah suatu bahan yang terdiri atas campuran nutrisi yang dipakai untuk menumbuhkan mikroba juga medium dapat digunakan pula untuk isolasi, memperbanyak, pengujian sifat-sifat fisiologi dan perhitungan mikroba.
2. Medium pertumbuhan yang baik adalah medium yang dibuat tetap steril hingga di dapat biakan murni.
3. Medium Nutrien Agar (NA) konsistensinya berbentuk padat dan berwarna kuning kecoklatan.

5.2  Saran

Dalam pelaksanaan praktikum praktikan harus hati-hati, agar tidak terjadi kesalahan. Serta keseriusan juga sangat diperlukan dalam praktikum ini agar praktikum dapat berlangsung dengan baik dan maksimal.

                                                                  DAFTAR PUSTAKA

1. Natsir, Djide dan Sartini, 2006, Mikrobiologi Farmasi Dasar, Universitas Hasanuddin, Makassar.
2. Pelczar, 1996, Dasar-Dasar Mikrobiologi, Universitas Indonesia, Jakarta.
3. Volk dan Wheeler, 1993, Mikrobiologi Dasar Jilid 1 Edisi ke 5, Erlangga, Jakarta.
4. Waluyo,2007.Mikrobiologi Umum.Malang: UMM Press.
5. Waluyo.2008.Dasar Dasar Mikrobiologi. Malang:UMM Press.